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二疫情报告和诊断2（第1页）

（二）实验室诊断

1.组织病理学诊断

组织病理学诊断是观察组织学病变（或称为显微病变）。

有些疫病引起的大体病变不明显或缺如，或不同疫病具有相同的解剖变化，仅靠肉眼很难做出判断，还需作组织病理学检查才有诊断价值，例如传染性海绵状脑病、鸡马立克病与白血病等。

有些病还需检查特定的组织器官，如疑为狂犬病时应取脑海马角组织进行包涵体检查。

2.微生物学诊断

微生物学诊断属于病原学诊断的范畴，是诊断动物传染病的最重要方法，常用诊断方法和步骤如下。

（1）病料的采集：

正确采集病料是微生物学诊断的重要环节。

病料力求新鲜，最好能在濒死时或死后数小时内采取；

应从症状明显、濒死期或自然死亡而且未经治疗的病例取材；

要求尽量减少杂菌污染，用具器皿应尽可能严格消毒。

通常可根据所怀疑病的类型和特性来决定采取哪些器官或组织。

原则上要求采取病原微生物含量多、病变明显的部位，同时易于采取，易于保存和运送。

如果缺乏临床资料，剖检时又难以判断疫病类型的可能范围时，应比较全面地取材，例如血液、肝、脾、肺、肾、脑和淋巴结等，同时要注意带有病变的部分。

如怀疑炭，则按规定方法取材。

（2）病料涂片、镜检：

通常把有显着病变的组织器官涂片数张，进行染色、镜检。

此法对于一些具有特征性形态的病原菌如炭疽杆菌、链球菌、巴氏杆菌等可以迅即做出诊断，但对大多数传染病来说，只能提供初步依据或参考。

（3）分离培养和鉴定：

用人工培养方法将病原体从病料中分离出来。

分离培养细菌、真菌、螺旋体等可选择适当的人工培养基，分离培养病毒可选用禽胚、动物或细胞组织等。

分得病原体后，再进行形态学、培养特性、动物接种（致病性）、免疫学及分子生物学等鉴定。

（4）动物接种试验：

有时人工培养分离到的微生物不一定是引起发病的病原体，因此需要选择对病原体最敏感的动物进行人工感染试验。

将病料用适当的方法处理并进行人工接种，然后根据对动物的致病力、症状和病理变化特点来帮助诊断。

当实验动物死亡或经一定时间剖杀后，观察体内变化，并采取病料进行涂片检查和分离鉴定。

一般常用的实验动物有家兔、小鼠、豚鼠、仓鼠、家禽、鸽子等，当实验动物对病原体无感受性时，可以采用有易感性的本种动物进行试验，但对于大、中型动物或特种动物因费用高，而且需要严格的隔离条件和消毒设施，因此只有在必要和条件许可时才进行本种动物接种试验。

从病料中分离出病原微生物，虽是确诊的重要依据，但也应注意动物的“健康带菌（毒）”现象，其结果还需与临床及流行病学、病理变化结合起来进行综合分析。有时即使没有发现病原体，也不能完全否定该种传染病的诊断，因为任何病原学方法都存在有漏检的可能。

3.免疫学诊断

免疫学诊断是传染病诊断和检疫中最常用、最重要的诊断方法之一，它包括血清学试验和变态反应两大类方法。

（1）血清学试验：

可以用已知抗原来测定被检动物血清中的特异性抗体，也可以用已知的抗体（免疫血清）来测定被检材料中的抗原。

免疫学方法检测的抗原可以是完整的病原体，也可以是病原体的一部分。

根据实验原理，血清学试验可分为中和试验（毒素中和试验、病毒中和试验等）、凝集试验（直接凝集试验，间接凝集试验，间接血凝试验、协同凝集试验和血细胞凝集抑制试验）、沉淀试验（环状沉淀试验、琼脂扩散沉淀试验和免疫电泳等）、溶细胞试验（溶菌实验、溶血试验）、补体结合试验以及免疫荧光技术、免疫酶技术，放射免疫测定、单克隆抗体技术等。

近年来，因其与现代科学技术相结合（如蛋白感芯片、多肤芯片等），血清学试验发展很快，在方法改进上日新月异，应用也越来越广，已成为传染病快速诊断的重要工具。

（2）变态反应：

动物患某些传染病（主要是慢性传染病）后，可对该病病原体或其产物（某种抗原物质）的再次进入产生强烈反应，即变态反应。

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